维生素C检测试剂盒（磷钼酸微板法)
产品货号：BA
产品规格：T
产品简介：
维生素C(VitaminC)又称L-抗坏血酸，是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素。在生物体内维生素C是一种抗氧化剂，为酸性己糖衍生物，是稀醇式己糖酸内酯，保护身体免于自由基的威胁，同时也是一种辅酶，其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。Vc有L-型和D-型两种异构体，只有L-型的才具有生理功能，还原型和氧化型都有生理活性。
维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法)检测原理是在强酸和偏磷酸根离子存在条件下，钼酸铵能与维生素C反应生成蓝色化合物，在一定浓度范围(样品浓度控制在25~μg/ml)，吸光度值与浓度呈线性关系，以酶标仪nm处检测吸光度，获得VitaminC含量。该试剂盒主要用于植物组织中的维生素C(抗坏血酸)的检测，其优点是：1、反应迅速；2、操作简便；3、还原糖及其他常见的还原物质对实验没有干扰，因此专一性好。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成：
需自备的仪器和用品：
蒸馏水、电子天平、研磨器或匀浆器、离心管或试管、离心机、水浴锅或恒温箱、酶标仪、96孔板。
操作步骤（仅供参考）：
1.配制组织匀浆液：按组织匀浆液A:组织匀浆液B:蒸馏水=8:1:91的比例混匀即得。
2.准备样品：取待测材料如青菜、水果、松针等，清洗擦干，准确称量1g，加入研磨器内，再加入少量组织匀浆液，研磨碎，留取上清，再次用组织匀浆液研磨，最后一并倒入10ml离心管，补充组织匀浆液至10ml，充分混匀，g离心5min，取0.05ml上清液，加入等量蒸馏水，即为待测液。
3.配制MPA工作液：取一支0.3gMPA粉末，充分溶解于10ml酸性缓冲液Ι中，也可根据使用情况称取一定量的MPA按比例溶解即可，4℃保存3~4天有效。
4.配制VitaminCAssaybuffer：取钼酸铵粉末0.5g，充分溶解于10ml蒸馏水中，也可根据使用情况称取一定量的钼酸铵加水按比例溶解即可，4℃避光保存。注意：钼酸铵溶于水会逐渐变化乳白色浊液，则不能使用。
5.配制系列VitaminC标准：取干净离心管或试管，按下表进行操作，依次稀释。
6.VitaminC加样：按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的VitaminC含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置2平行孔，求平均值。
7.VitaminC测定：立即混匀，30℃水浴20min，空白调零，以酶标仪测定nm处系列标准孔、测定孔的吸光度。
计算：以系列标准VitaminC浓度(50、75、、、、、μg/ml)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程，以测定孔的吸光度代入回归方程求得维生素C含量。
g样品中维生素C含量(mg)
=(c0×V1)×/(m1×0)=(c0×V1)/(m1×10)
式中：c0:待测样品的吸光度值在标准曲线上查出的维生素C的浓度(μg/ml)
V1:待测液的总体积(ml)
m1:样品质量(g)
0:μg换算成mg
注意事项：
1.VitaminC标准避免反复冻融，以免失效或效率下降。
2.组织匀浆液A保存温度过低时易产生结晶，可用温水浴溶解后再使用。
3.VitaminCAssaybuffer室温保存时间过长或者过期会出现白色粘稠物，不可使用，应换新的产品使用。不使用时建议4℃保存。
4.待测样品如不能及时测定，应置于2~8℃保存，3天内稳定。
5.如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
有效期：6个月有效。4℃运输，4℃保存。
